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專題蛋白質技術的SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳實驗[原理]蛋白質在十二烷基硫酸鈉（SDS）和巰基乙醇的作用下，分子中的二硫鍵還原，氫鍵等打開，形成按1.4gSDS/1g蛋白質比例的SDS-蛋白質多肽復合物，該復合物帶負電，故可在聚丙烯酰胺凝膠電泳中向正極遷移，且主要由于凝膠的分子篩作用，遷移速率與蛋白質的分子量大小有關，因此可以濃縮和分離蛋白質多肽。聚丙烯酰凝膠電泳分離蛋白質多數采用一種不連續的緩沖系統，主要分為較低濃度的成層膠和較高濃度的分離膠，配制凝膠的緩沖液，其pH值和離子強度也相應不同，故電泳時，樣品中的SDS-多肽...
3-1 2019
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蛋白質技術專題：聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定IgG純度（一）原理由于聚丙烯酰胺凝膠的濃度可以按要求配制，因此可以形成“連續系統”和“不連續系統”兩種電泳系統?！安贿B續系統”大的特點在于大大提高了樣品分離的分辨率。這種電泳的主要特點是：（1）使用兩種不同濃度的凝膠系統；（2）配制兩種凝膠的緩沖溶液成分及pH不同，并且與電泳槽中電泳緩沖液的成分、pH也不相同。在實驗中，電泳凝膠分為兩層：上層膠為低濃度的大孔膠，稱為濃縮膠或成層膠，配制此層膠的緩沖液是Tris-HCl，pH6.7；下層膠則是高濃度的小孔膠，稱為分離膠或電泳膠，成膠的緩...
2-27 2019
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蛋白質技術專題：血清蛋白瓊脂糖凝膠電泳【原理】瓊脂糖（agarose）是經過挑選，以質地較純的瓊脂（agar）作為原料而制成的。瓊脂在化學上是由瓊脂糖和瓊脂膠組成的復合物。瓊脂膠是一含有硫酸根和羥基的多糖，它具有離子交換性質，這種性質會給電泳及凝膠過濾以的影響。瓊脂糖是直鏈多糖，它由D－半乳糖和3,6－脫水－L－半乳糖的殘基交替排列組成。瓊脂糖主要通過氫鍵而形成凝膠。電泳時因凝膠含水量大（98－99%），近似自由電泳，因為固體支持物的影響少，故電泳速度快，區帶整齊。而且由于瓊脂糖不含帶電荷的基團，電滲影響很少，是...
2-27 2019
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蛋白質技術專題：凝膠過濾層析實驗凝膠過濾層析（gelfiltrationchromatography）法又稱排阻層析或分子篩方法，主要是根據蛋白質的大小和形狀，即蛋白質的質量進行分離和純化。層析柱中的填料是某些惰性的多孔網狀結構物質，多是交聯的聚糖類物質，使蛋白質混合物中的物質按分子大小的不同進行分離。實驗方法蛋白質的凝膠過濾分離實驗材料蛋白質試劑、試劑盒凝膠過濾緩沖液儀器、耗材布氏漏斗凝膠過濾層析柱分光光度計實驗步驟1.如果凝膠過濾的介質是干粉，則需在凝膠過濾緩沖液中*溶脹。2.在遠離過往通道及直接光照的...
2-25 2019
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瓊脂糖凝膠電泳的原理及實驗過程實驗原理瓊脂糖凝膠電泳常用于分離、鑒定DNA、RNA分子混合物，以瓊脂凝膠作為支持物，利用DNA分子在電場中時的電荷效應和分子篩效應，達到分離混合物的目的。DNA分子在高于其等電點的溶液中帶負電，在電場中由陰極向陽極運動。在一定的電場強度下，忽略DNA分子攜帶的電荷，DNA分子的遷移速度取決于分子篩效應，即分子本身的大小和構型是主要的影響因素。DNA分子的遷移速度與相對分子量成反比。不同構型的DNA分子的遷移速度不同。如環形DNA分子樣品，其中有三種構型的分子：超螺旋分子（c...
2-25 2019
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蠕動泵、恒流泵及軟管泵的選型方法蠕動泵的原理簡介：蠕動泵由于輸出的流量非常穩定因此又叫恒流泵，由于蠕動泵是靠擠壓軟管而達到泵送流體的功能的因此又叫軟管泵。蠕動泵的機械原理十分簡單。它是由轉輪擠壓著泵管并轉動從而推動管內的流體向前移動從而產生流體流動的，就象用兩根手指夾擠一跟充滿液體的軟管一樣，隨著手指的移動，管內形成負壓，液體隨之流動。蠕動泵、恒流泵和軟管泵的特點：1、潔清無污染：流體只通過和接觸蠕動泵軟管。2、精度高：恒流、重現精度高達0.5%，流量可**調節。3、低剪切力：是輸送剪切敏感，侵蝕性強流體的...
2-20 2019
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按工作原理對恒流泵的分類1.容積式泵靠工作部件的運動造成工作容積周期性地增大和縮小而吸排液體，并靠工作部件的擠壓而直接使液體的壓力能增加。根據運動部件運動方式的不同又分為：往復泵和回轉泵兩類。根據運動部件結構不同，有：活塞泵和柱塞泵;有齒輪泵、螺桿泵、葉片泵和水環泵。2.葉輪式泵葉輪式泵是靠葉輪帶動液體高速回轉而把機械能傳遞給所輸送的液體。根據泵的葉輪和流道結構特點的不同可分為：1）離心泵2）軸流泵3）混流泵4）旋渦泵。3.噴射式泵是靠工作流體產生的高速射流引射流體，然后再通過動量交換而使被引射流體...
1-31 2019
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凝膠成像分析系統選購技巧“只比對的，不比費的”我們崇尚實踐，然而，現實經常不配合我們，或者是沒有Demo機，或者是有時我們還真的很難根據實驗結果分辨出性能上的差異，當我們在考察儀器Demo的情況后還是無法分辨其性能之優劣時，除了可以了解其他人的使用情況和評價，就只能推開儀器看參數了。當然看參數是有竅門的。很多成像儀的參數寫了幾十條，其實關鍵的就那么幾條。我們對比不同廠商的參數時一定要注意只比關鍵的，而對那些無關痛癢的參數則大可以視而不見。另外，千萬不要被廠商自己給相應產品的評分所欺騙，他的那套評分系...
1-17 2019
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