電泳帶型分析
更新時(shí)間：2021-08-23 點(diǎn)擊次數(shù)：1399
那么下面上海金鵬分析儀器有限公司為大家簡(jiǎn)單介紹一下關(guān)于電泳帶型分析：
DNA電泳需要進(jìn)行帶型分析，在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中常會(huì)發(fā)現(xiàn)所得的帶型出現(xiàn)在這樣那樣的問(wèn)題。在此，我們對(duì)DNA帶型做了相應(yīng)的分析。
| 帶型 | 原因分析 | 解決辦法 |
| 弱帶或無(wú)帶 | 上樣的DNA量不夠 | 增加DNA的上樣量，聚丙烯酰胺凝膠電泳比瓊脂糖電泳靈敏度稍高 |
| DNA降解 | 避免DNA的核酸酶污染 |
| 電泳時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，DNA跑出 | 減短電泳時(shí)間，降低電壓，增強(qiáng)凝膠濃度 |
| EB染色的DNA，紫外光源不合適 | 應(yīng)用短波長(zhǎng)（254nm），增強(qiáng)紫外燈靈敏度 |
| DNA帶缺失 | 小DNA帶走出凝膠 | 減短電泳時(shí)間，降低電壓，增強(qiáng)凝膠濃度 |
| 分子大小相近的DNA帶不易分辨 | 增加電泳時(shí)間，核準(zhǔn)正確的凝膠濃度 |
| DNA 變性 | 電泳前請(qǐng)勿高溫加熱DNA鏈，以20mM NaCl Buffer稀釋DNA |
| 巨大DNA鏈，凝膠電泳不合適 | 在脈沖凝膠電泳上分析 |
| DNA帶模糊 | DNA降解 | 避免核酸酶污染 |
| DNA上樣量過(guò)多 | 減少凝膠中DNA上樣量 |
| 所用電泳條件不合適 | 電泳時(shí)電壓不應(yīng)超過(guò)20V/cm，溫度＜30℃,巨大DNA鏈，溫度應(yīng)＜15℃，核查所用電泳緩沖液是否有足夠的緩沖能力 |
| DNA樣含鹽過(guò)高 | 電泳前通過(guò)乙醇沉淀去除過(guò)多的鹽 |
| 有蛋白污染 | 電泳前酚抽提去除蛋白 |
| DNA變性 | 電泳前勿加熱，用20mM NaCl緩沖液稀釋DNA |
| 不規(guī)則DNA帶遷移 | 對(duì)于λ/Hind III片段COS位點(diǎn)復(fù)性 | 電泳前加熱DNA 65℃加熱5-10分鐘，然后在冰上冷卻5分鐘 |
| 電泳條件不合適 | 電泳電壓不超過(guò)20V/cm，溫度＜30℃，電泳緩沖液有足夠的緩沖能力 |
| DNA變性 | 以20mM NaCl Buffer稀釋DNA，電泳前勿加熱 |
以上就是上海金鵬分析儀器有限公司為大家整理總結(jié)關(guān)于電泳帶型分析。
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